炭疽桿菌(Bacillus anthraci)屬于芽孢桿菌屬,是引起某些家畜,、野獸和人類炭疽?。ㄈ诵蠊不迹┑牟≡0l(fā)病率最高的是牛羊,,豬也可發(fā)生,,人常因屠宰、食用或與病死畜接觸而感染,。炭疽桿菌對(duì)社會(huì)公共衛(wèi)生和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的危害,,迄今仍占相當(dāng)大的比重。由該菌引起的炭疽病幾乎遍及世界各地,,四季均可發(fā)生,。
炭疽桿菌菌體粗大,兩端平截或凹陷,,是致病菌中最大的細(xì)菌,。排列似竹節(jié)狀,無(wú)鞭毛,,無(wú)動(dòng)力,,革蘭氏染色陽(yáng)性,本菌在氧氣充足,溫度適宜(25~30℃)的條件下易形成芽胞,。
炭疽桿菌受低濃度青霉素作用,,菌體可腫大形成圓珠,稱為“串珠反應(yīng)”,。這也是炭疽桿菌特有的反應(yīng),。
本菌專性需氧,在普通培養(yǎng)基中易培養(yǎng),,易繁殖,。只要掘取一點(diǎn)泥土,放在水里煮一會(huì),,接種在加了血液的培養(yǎng)基上就可以了。在培養(yǎng)過(guò)程中,,最適溫度為25~30℃最適pH為7.2~7.4,在瓊脂平板培養(yǎng)24小時(shí),長(zhǎng)成直徑2~4mm的粗糙菌落,。菌落呈毛玻璃狀,邊緣不整齊,,呈卷發(fā)狀,有一個(gè)或數(shù)個(gè)小尾突起,,這是本菌向外伸延繁殖所致,。在5~10%綿羊血液瓊脂平板上,菌落周圍無(wú)明顯的溶血環(huán),,但培養(yǎng)較久后可出現(xiàn)輕度溶血,。菌落特征出現(xiàn)最佳時(shí)間為12~15小時(shí)。菌落有粘性,用接種針鉤取可拉成絲,,稱為“拉絲”現(xiàn)象,。在普通肉湯培養(yǎng)18~24小時(shí),管底有絮狀沉淀生長(zhǎng),,無(wú)菌膜,,菌液清亮。有毒株在碳酸氫鈉平板,,20%CO2培養(yǎng)下,,形成粘液狀菌落(有莢膜),而無(wú)毒株則為粗糙狀,。大量的炭疽桿菌繁 殖在一起可以形成炭疽桿菌菌落,。
繁殖體抵抗力不強(qiáng),易被一般消毒劑殺滅,,而芽胞抵抗力強(qiáng),,在干燥的室溫環(huán)境中可存活20年以上,在皮毛中可存活數(shù)年,。牧場(chǎng)一旦被污染,,芽胞可存活20~30年。經(jīng)直接日光曝曬100小時(shí),、煮沸40分鐘,、l40℃干熱3小時(shí)、110℃高壓蒸汽60分鐘,、以及浸泡于10%甲醛溶液15分鐘,、新配苯酚溶液(5%)和20%含氯石灰溶液數(shù)日以上,才能將芽胞殺滅,。炭疽芽胞對(duì)碘特別敏感,,對(duì)青霉素、先鋒霉素,、鏈霉素,、卡那霉素等高度敏感。
1.莢膜多肽抗原由D-谷氨酸多肽組成,。
2.菌體多糖抗原由等分子量的乙?;咸烟前泛虳-半乳糖組成。
致死因子,。三種成份均具有抗原性,,不耐熱,是致病的物質(zhì)基礎(chǔ)之一,。
主要是本菌的莢膜和產(chǎn)生的毒素引起致病,。莢膜由D-谷氨酸多肽組成,,能抑制抗體和抵抗吞噬細(xì)胞的吞噬作用,促進(jìn)該菌入侵后擴(kuò)張繁殖,。其毒素可增加微血管的通透性,,改變血液正常循環(huán),損害肝臟功能,,干擾糖代謝,,最后可導(dǎo)致死亡,。
人類主要通過(guò)工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)而感染。機(jī)體抵抗力降低時(shí),,接觸污染物品可發(fā)生下列疾病:
1.皮膚炭疽 最常見(jiàn),多發(fā)生于屠宰,、制革或毛刷工人及飼養(yǎng)員,。本菌由體表破損處進(jìn)入體內(nèi),,開(kāi)始在入侵處形成水癤,、水皰,、膿皰,、中央部呈黑色壞死,周圍有浸潤(rùn)水腫,、如不及時(shí)治療,細(xì)菌可進(jìn)一步侵入局部淋巴結(jié)或侵入血流,,引起敗血癥死亡,。
2.縱隔障炭疽少見(jiàn),,由吸入病菌芽胞所致,,多發(fā)生于皮毛工人,,病死率高。病初似感冒,,進(jìn)而出現(xiàn)嚴(yán)重的支氣管肺炎,,可在2~3天內(nèi)死于中毒性休克,。
3.腸炭疽 由食入病獸肉制品所致,,以全身中毒癥狀為主,,并有胃腸道潰瘍,、出血及毒血癥,發(fā)病后2~3日內(nèi)死亡,。
上述疾病若引起敗血癥時(shí),可繼發(fā)“炭疽性腦膜炎”,。炭疽桿菌的致病性取決于莢膜和毒素的協(xié)同作用,。
注射炭疽外毒素中保護(hù)性抗原于機(jī)體,,能形成抗毒素免疫,,對(duì)受染炭疽有保護(hù)作用,。但單純的莢膜抗體對(duì)機(jī)體沒(méi)有保護(hù)作用。病后可獲較強(qiáng)的免疫力,。
將標(biāo)本直接涂片,沙黃莢膜染色鏡檢,,觀察形態(tài)及莢膜特征,可以初步幫助診斷,確診應(yīng)進(jìn)行血平板分離培養(yǎng),,37℃孵育12~15小時(shí),鉤取可疑菌落,,進(jìn)行青霉素串珠試驗(yàn),,噬菌體裂解試驗(yàn),碳酸氫鈉平板二氧化碳培養(yǎng),。莢膜腫脹試驗(yàn)和小白鼠致病力試驗(yàn)等與其他需氧芽孢桿菌進(jìn)行鑒別確定,。
通過(guò)革蘭氏染色法,我們發(fā)現(xiàn)炭疽桿菌可以被染成紫色,,可見(jiàn)它是革蘭氏陽(yáng)性菌,。所以,青霉素是首選的抗生素,。
根據(jù)不同的感染類型,治療也不同,。皮膚炭疽每日注射青霉素總量為100~200萬(wàn)單位。同時(shí)可加用四環(huán)素,、鏈霉素,、氯霉素或新霉素。對(duì)于肺炭疽及腸炭疽,,每日青霉素總量應(yīng)在600萬(wàn)單位以上,;對(duì)于炭疽性腦膜炎及敗血癥,每日青霉素總量要超過(guò)1,000單位。
除了上述抗生素外 ,其他的抗菌藥物,比如磺胺、呋喃唑酮等,對(duì)其也有較強(qiáng)的作用。
預(yù)防人類炭疽首先應(yīng)防止家畜炭疽的發(fā)生。家畜炭疽感染消滅后,,人類的傳染源也隨之消滅。
目前我國(guó)使用的炭疽活疫菌,,作皮上劃痕接種,,免疫力可維護(hù)半年至一年。青霉素是治療炭疽的首選藥物,,對(duì)腸道及吸入性炭疽治療困難,有條件的可用抗血清,。
美研究用炭疽桿菌治療癌癥
科學(xué)時(shí)報(bào)訊癌癥是威脅人類生命的疾病之一,,多年來(lái)各國(guó)科學(xué)家的癌癥在治療上不斷探索,,希望能找到一種有效的方法以實(shí)現(xiàn)對(duì)癌癥的徹底根治,。
不久前,,曾引起世界廣泛關(guān)注的炭疽桿菌也開(kāi)始引起科學(xué)家的青睞,,雖然炭疽桿菌在被人體吸入后將致人于死命,,或引起各種各樣的并發(fā)癥,但是美國(guó)馬里蘭州全國(guó)衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的研究人員正在實(shí)驗(yàn)著將炭疽桿菌毒素通過(guò)基因工程技術(shù)進(jìn)行重新組合,,從而改變炭疽桿菌毒素的成分使之對(duì)人體健康無(wú)害,,并在對(duì)付某些癌細(xì)胞上顯示出潛在的價(jià)值。
科學(xué)家使用的實(shí)驗(yàn)工具是模擬腫瘤生長(zhǎng)狀態(tài)的老鼠,,通過(guò)在老鼠身上注射這種經(jīng)過(guò)改良的炭疽桿菌毒素后發(fā)現(xiàn),,它能夠在一定程度上限制老鼠腫瘤所獲得的血流量,抑制腫瘤的生長(zhǎng),。此外研究中還發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)改良的炭疽桿菌毒素還能夠直接摧毀某些腫瘤細(xì)胞的瘤體本身,,其中最容易受到炭疽桿菌毒素影響的是黑色毒瘤,結(jié)腸腫瘤和乳腺癌等,。由于炭疽桿菌具有相當(dāng)大的危險(xiǎn)性,,稍有不慎將有可能導(dǎo)致一些難以想像的后果,,因此科學(xué)家也同時(shí)指出,使用炭疽桿菌治療癌癥的實(shí)驗(yàn)必須在動(dòng)物身上經(jīng)過(guò)幾年嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)之后才能用在人體的臨床實(shí)驗(yàn)中,。
炭疽桿菌從損傷的皮膚,、胃腸粘膜及呼吸道進(jìn)入人體后,首先在局部繁殖,,產(chǎn)生毒素而致組織及臟器發(fā)生出血性浸潤(rùn),、壞死和高度水腫,形成原發(fā)性皮膚炭疽,、腸炭疽,、肺炭疽等。當(dāng)機(jī)體抵抗力降低時(shí),,致病菌即迅速沿淋巴管及血管向全身擴(kuò)散,,形成敗血癥和繼發(fā)性腦膜炎。皮膚炭疽因缺血及毒素的作用,,真皮的神經(jīng)纖維發(fā)生變化,,故病灶處常無(wú)明顯的疼痛感。炭疽桿菌的毒素可直接損傷血管的內(nèi)皮細(xì)胞,,使血管壁的通透性增加,,導(dǎo)致有效血容量減少,微循環(huán)灌注量下降,,血液呈高凝狀態(tài),,出現(xiàn)DIC和感染性休克。
主要病理改變?yōu)楦髋K器,、組織的出血性浸潤(rùn),、壞死和水腫。皮膚炭疽呈癰樣病灶,,皮膚上可見(jiàn)界限分明的紅色浸潤(rùn),中央隆起呈炭樣黑色痂皮,,四周為凝固性壞死區(qū),。鏡檢可見(jiàn)上皮組織呈急性漿液性出血性炎癥,間質(zhì)水腫顯著,,組織結(jié)構(gòu)離解,,壞死區(qū)及病灶深處均可找到炭疽桿菌。
腸炭疽病變主要在小腸,。腸壁呈局限性癰樣病灶及彌漫出血性浸潤(rùn),。病變周圍腸壁有高度水腫及出血,腸系膜淋巴結(jié)腫大,,腹膜也有出血性滲出,,腹腔內(nèi)有漿液性含血的滲出液,,內(nèi)有大量致病菌。
肺炭疽呈出血性氣管炎,、支氣管炎,、小葉性肺炎或梗死區(qū)。支氣管及縱膈淋巴結(jié)腫大,,均呈出血性浸潤(rùn),,胸膜與心包亦可受累。
腦膜炭疽的軟腦膜及腦實(shí)質(zhì)均極度充血,、出血及壞死,。大腦、橋腦和延髓等組織切面均見(jiàn)顯著水腫及充血,。蛛網(wǎng)膜下腔有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和大量菌體,。
炭疽桿菌敗血癥患者,全身各組織及臟器均為廣泛性出血性浸潤(rùn),、水腫及壞死,,并有肝、腎濁腫和脾腫大,。
皮膚炭疽約占98%,,病變多見(jiàn)于面、頸,、肩,、手和腳等裸露部位皮膚。初為斑疹或丘疹,,次日出現(xiàn)水皰,,內(nèi)含淡黃色液體,周圍組織硬而腫脹,。第3-4日中心呈現(xiàn)出血性壞死稍下陷,,四周有成群小水泡,水腫區(qū)繼續(xù)擴(kuò)大,。第5-7日壞死區(qū)潰破成淺潰瘍,,血樣滲出物結(jié)成硬而黑似炭塊狀焦痂,痂下有肉芽組織生成(即炭疽癰),。焦痂壞死區(qū)直徑大小有等,,其周圍皮膚浸潤(rùn)及水腫范圍較大。由于局部末梢神經(jīng)受壓而疼痛不著,,稍有癢感,,無(wú)膿腫形成,這是炭疽的特點(diǎn),。以后隨水腫消退,,黑痂在1-2周內(nèi)脫落,,逐漸愈合成疤。起病時(shí)出現(xiàn)發(fā)熱(38-39℃)頭痛,、關(guān)節(jié)痛,、周身不適以及局部淋巴結(jié)和脾腫大等。
少數(shù)病例局部無(wú)黑痂形成而呈大塊狀水腫(即惡性水腫),,其擴(kuò)展迅速,,可致大片壞死,多見(jiàn)于眼瞼,、頸,、大腿及手等組織疏松處。全身癥狀嚴(yán)重,,若貽誤治療,,預(yù)后不良。
肺炭疽多為原發(fā)性,,也可繼發(fā)于皮膚炭疽,。可急性起病,,輕者有胸悶,、胸痛、全身不適,、發(fā)熱,、咳嗽、咯粘液痰帶血,。重者以寒戰(zhàn),、高熱起病,由于縱膈淋巴結(jié)腫大,、出血并壓迫支氣管造成呼吸窘迫,、氣急喘鳴、咳嗽,、紫紺,、血樣痰等。肺部?jī)H可聞及散在的細(xì)小濕羅音或有胸膜炎體征,。肺部體征與病情常不相符。X線見(jiàn)縱膈增寬,、胸水及肺部炎癥,。
腸炭疽可表現(xiàn)為急性腸炎型或急腹癥型。急性腸炎型潛伏期12-18小時(shí),。同食者相繼發(fā)病,,似食物中毒,。癥狀輕重不一,發(fā)病時(shí)突然惡心嘔吐,、腹痛,、腹瀉。急腹癥型患者全身中毒癥狀嚴(yán)重,,持續(xù)性嘔吐及腹瀉,,排血水樣便,腹脹,、腹痛,,有壓痛或呈腹膜炎征象,常并發(fā)敗血癥和感染性休克,。如不及時(shí)治療??蓪?dǎo)致死亡。
腦膜炭疽(炭疽性腦膜炎)多為繼發(fā)性,。起病急驟,,有劇烈頭痛、嘔吐,、昏迷,、抽搐,明顯腦膜刺激癥狀,,腦脊液多呈血性,,少數(shù)為黃色,壓力增高,,細(xì)胞數(shù)增多,。病情發(fā)展迅猛,常因誤診得不到及時(shí)治療而死亡,。
癥狀實(shí)例
在炭疽桿菌首先被發(fā)現(xiàn)的佛羅里達(dá)州,,兩名參加了9.11自殺性攻擊事件的人曾經(jīng)租借過(guò)屬于一家報(bào)紙編輯的公寓。而最早的炭疽桿菌的例子就發(fā)生在這個(gè)編輯的辦公室,。
炭疽桿菌菌體粗大,,兩端平截或凹陷。排列似竹節(jié)狀,,無(wú)鞭毛,,無(wú)動(dòng)力,革蘭氏染色陽(yáng)性,,本菌在氧氣充足,,溫度適宜(25-30℃)的條件下易形成芽胞。在活體或未經(jīng)解剖的尸體內(nèi),,則不能形成芽胞,。芽胞呈橢圓形,,位于菌體中央,其寬度小于菌體的寬度,。在人和動(dòng)物體內(nèi)能形成莢膜,,在含血清和碳酸氫鈉的培養(yǎng)基中,孵育于CO2環(huán)境下,,也能形成莢膜,。形成莢膜是毒性特征。炭疽桿菌受低濃度青霉素作用,,菌體可腫大形成園珠,,稱為“串珠反應(yīng)”。這也是炭疽桿菌特有的反應(yīng),。本菌專性需氧,,在普通培養(yǎng)基中易繁殖。最適溫度為37℃,,最適pH為7.2-7.4,,在瓊脂平板培養(yǎng)24小時(shí),長(zhǎng)成直徑2-4mm的粗糙菌落,。菌落呈毛玻璃狀,,邊緣不整齊,呈卷發(fā)狀,,有一個(gè)或數(shù)個(gè)小尾突起,,這是本菌向外伸延繁殖所致在5-10%綿羊血液瓊脂平板上,菌落周圍無(wú)明顯的溶血環(huán),,但培養(yǎng)較久后可出現(xiàn)輕度溶血,。菌落特征出現(xiàn)最佳時(shí)間為12-15小時(shí)。菌落有粘性,,用接種針鉤取可拉成絲,,稱為“拉絲”現(xiàn)象。
繁殖體抵抗力不強(qiáng),,易被一般消毒劑殺滅,,而芽胞抵抗力強(qiáng),在干燥的室溫環(huán)境中可存活數(shù)十年,,在皮毛中可存活數(shù)年,。牧場(chǎng)一旦被污染,芽胞可存活數(shù)年至數(shù)十年,。煮沸10分鐘或干熱140℃3小時(shí)可將芽胞殺死,。
抗原結(jié)構(gòu)
1.莢膜多肽抗原由D谷氨酸多肽組成,抗原性單一,若以高效價(jià)抗莢膜血清與具莢膜炭疽桿菌作用,,在其周邊外發(fā)生抗體的特異性沉淀反應(yīng),鏡下可見(jiàn)莢膜腫脹,。
2.菌體多糖抗原由等分子量的乙?;咸烟前泛虳半乳糖組成,能耐熱,,與毒力無(wú)關(guān),。這種抗原沒(méi)有特異性,能與其他需氧芽胞桿菌,,肺炎球菌14型及人類A血型物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng),。能產(chǎn)生Ascoli熱沉淀反應(yīng)(抗原在病畜皮毛、腐敗臟器中長(zhǎng)時(shí)間煮沸仍可與相應(yīng)抗體發(fā)生沉淀反應(yīng)),,用于流行病學(xué)調(diào)查,。
3.芽胞抗原有芽孢外膜和皮質(zhì)組成,是特異性抗原,,具有免疫原性,,有血清學(xué)診斷價(jià)值。
3.此復(fù)合物具有抗吞噬作用和免疫原性,。三種成份均具有抗原性,,不耐熱,是致病的物質(zhì)基礎(chǔ)之一,,單獨(dú)作用不致病,,當(dāng)聯(lián)合2種或三種時(shí)才會(huì)致病。水腫因子EF為腺苷酸環(huán)化酶,,保護(hù)性抗原PA為菌體蛋白抗原,,致死因子LF為鋅金屬氧化酶。EF與PA形成ET,,導(dǎo)致皮膚水腫,、肺水腫、出血,;LF與PA形成LT,,有強(qiáng)于ET的致病致死作用;三者聯(lián)合時(shí)表現(xiàn)出炭疽及其中毒癥狀,。
采集皮膚炭疽的膿液,、滲出物,吸入性炭疽的咯痰,,腸炭疽的糞便以及病人的的血液等送檢,,獸尸禁止解剖,可割取耳朵或舌尖一片送檢。37℃孵育12-15小時(shí),。莢膜腫脹試驗(yàn)和小白鼠致病力試驗(yàn)等與其他需氧芽胞桿菌進(jìn)行鑒別確定,。