核酸檢測(cè)是查找患者的呼吸道標(biāo)本,、血液或糞便中是否存在外來(lái)入侵的病毒的核酸,,來(lái)確定是否被新冠病毒感染。因此一旦檢測(cè)為核酸“陽(yáng)性”,,即可證明患者體內(nèi)有病毒存在,。
2022年5月13日,國(guó)家衛(wèi)健委醫(yī)政醫(yī)管局監(jiān)察專員郭燕紅在國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制新聞發(fā)布會(huì)上表示,,全國(guó)有1.3萬(wàn)家醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)可以開展核酸檢測(cè),、擁有15.3萬(wàn)的專業(yè)技術(shù)人員從事核酸檢測(cè)技術(shù)工作,核酸檢測(cè)能力已經(jīng)能夠達(dá)到單管每日5700萬(wàn)管,,核酸檢測(cè)的能力,,得到了顯著的提升。
2022年12月14日起,,不再公布無(wú)癥狀感染者數(shù)據(jù),。
所有生物除朊病毒外都含有核酸,核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),,新型冠狀病毒是一種僅含有RNA的病毒,,病毒中特異性RNA序列是區(qū)分該病毒與其它病原體的標(biāo)志物。新型冠狀病毒出現(xiàn)后,中國(guó)科學(xué)家在極短的時(shí)間里完成了對(duì)新型冠狀病毒全基因組序列的解析,,并通過(guò)與其它物種的基因組序列對(duì)比,,發(fā)現(xiàn)了新型冠狀病毒中的特異核酸序列。臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過(guò)程中,,如果能在患者樣本中檢測(cè)到新型冠狀病毒的特異核酸序列,,應(yīng)提示該患者可能被新型冠狀病毒感染。
新型冠狀病毒的核酸檢測(cè)的取樣方法既不需要開刀也不需要打針,,只要“輕輕一抹”,。到了發(fā)熱門診或者是相應(yīng)的檢查室,醫(yī)生會(huì)讓病人張開嘴,,用一個(gè)像棉簽一樣的拭子去擦拭扁桃體和咽隱窩附近的分泌物(就是新聞中經(jīng)常提及到的咽拭子),,也可以通過(guò)鼻腔取鼻咽后部的分泌物,然后放到試管里面,,再交給檢驗(yàn)科去做相應(yīng)的病毒核酸的檢查,。
核酸檢測(cè)需要經(jīng)過(guò)取樣、留樣,、保存,、核酸提取、上機(jī)檢測(cè)五個(gè)步驟,。
第一步需要采集人體的分泌物,,用鼻拭子或咽拭子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側(cè)咽扁桃體處;
第二步需要醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行留樣,,將拭子頭浸入細(xì)胞保存液中,,折斷尾部后立即旋緊管蓋;
第三步需要將樣本管放入密封袋中保存好并及時(shí)送檢,;
第四步便將需樣本送進(jìn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行核酸提?。?/p>
最后一步便進(jìn)行熒光PCR核酸檢測(cè),,將提取物進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng),。
1.鼻咽拭子:采樣人員一手輕扶被采集人員的頭部,一手執(zhí)拭子,,拭子貼鼻孔進(jìn)入,,沿下鼻道的底部向后緩緩深入,由于鼻道呈弧形,,不可用力過(guò)猛,,以免發(fā)生外傷出血。待拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時(shí),,輕輕旋轉(zhuǎn)一周(如遇反射性咳嗽,,應(yīng)停留片刻),,然后緩緩取出拭子,將拭子頭浸入含2~3ml病毒保存液(也可使用等滲鹽溶液,、組織培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液)的管中,,尾部棄去,旋緊管蓋,。
2.咽拭子:被采集人員先用生理鹽水漱口,,采樣人員將拭子放入無(wú)菌生理鹽水中濕潤(rùn)(禁止將拭子放入病毒保存液中,避免抗生素引起過(guò)敏),,被采集人員頭部微仰,,嘴張大,并發(fā)“啊”音,,露出兩側(cè)咽扁桃體,,將拭子越過(guò)舌根,在被采集者兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來(lái)回擦拭至少3次,,然后再在咽后壁上下擦拭至少3次,,將拭子頭浸入含2~3ml病毒保存液(也可使用等滲鹽溶液、組織培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液)的管中,,尾部棄去,旋緊管蓋,。咽拭子也可與鼻咽拭子放置于同一管中,。
3.鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。將收集器頭部插入鼻腔或氣管,,接通負(fù)壓,,旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出,收集抽取的粘液,,并用3ml采樣液沖洗收集器1次(亦可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來(lái)替代收集器),。
4.深咳痰液:要求病人深咳后,將咳出的痰液收集于含3ml采樣液的采樣管中,。如果痰液未收集于采樣液中,,可在檢測(cè)前,加入2~3ml采樣液,,或加入痰液等體積的痰液消化液,。
5.支氣管灌洗液:將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管(約30cm深處),注入5ml生理鹽水,,接通負(fù)壓,,旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出,收集抽取的粘液,,并用采樣液沖洗收集器1次,,也可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來(lái)替代收集。
6.肺泡灌洗液:局部麻醉后將纖維支氣管鏡通過(guò)口或鼻經(jīng)過(guò)咽部插入右肺中葉或左肺舌段的支氣管,將其頂端契入支氣管分支開口,,經(jīng)氣管活檢孔緩緩加入滅菌生理鹽水,,每次30~50ml,總量100~250ml,,不應(yīng)超過(guò)300ml,。
7.糞便標(biāo)本:取1ml標(biāo)本處理液,挑取黃豆粒大小的便標(biāo)本加至管中,,輕輕吹吸3-5次,,室溫靜置10分鐘,以8000rpm離心5分鐘,,吸取上清液進(jìn)行檢測(cè),。
8.肛拭子:用消毒棉拭子輕輕插入肛門3~5cm,再輕輕旋轉(zhuǎn)拔出,,立即放入含有3~5ml病毒保存液的15ml外螺旋蓋采樣管中,,棄去尾部,旋緊管蓋,。
9.血液標(biāo)本:建議使用含有EDTA抗凝劑的真空采血管采集血液標(biāo)本5ml,,根據(jù)所選用核酸提取試劑的類型確定以全血或血漿進(jìn)行核酸提取。如需分離血漿,,將全血1500~2000rpm離心10分鐘,,收集上清于無(wú)菌螺口塑料管中。
10.血清標(biāo)本:用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本5ml,,室溫靜置30分鐘,,1500~2000rpm離心10分鐘,收集血清于無(wú)菌螺口塑料管中,。
實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法
陰性:無(wú)Ct值或Ct為40,。
陽(yáng)性:Ct值<37,可報(bào)告為陽(yáng)性,。
灰區(qū):Ct值在37-40之間,,建議重復(fù)實(shí)驗(yàn),若重做結(jié)果Ct值<40,,擴(kuò)增曲線有明顯起峰,,該樣本判斷為陽(yáng)性,否則為陰性。
注:如使用商品化試劑盒,,則以廠家提供的說(shuō)明書為準(zhǔn),。
實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽(yáng)性病例需滿足以下兩個(gè)條件中的一個(gè):
(1)同一份標(biāo)本中新型冠狀病毒2個(gè)靶標(biāo)(ORF1ab、N)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性,。如果出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果,,則需要重新采樣,,重新檢測(cè)。如果仍然為單靶標(biāo)陽(yáng)性,,判定為陽(yáng)性,。
(2)兩種標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光RT-PCR同時(shí)出現(xiàn)單靶標(biāo)陽(yáng)性,或同種類型標(biāo)本兩次采樣檢測(cè)中均出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果,,可判定為陽(yáng)性,。
核酸檢測(cè)結(jié)果陰性不能排除新型冠狀病毒感染,需要排除可能產(chǎn)生假陰性的因素,,包括:樣本質(zhì)量差,,比如口咽等部位的呼吸道樣本;樣本收集的過(guò)早或過(guò)晚,;沒有正確的保存,、運(yùn)輸和處理樣本;技術(shù)本身存在的原因,,如病毒變異,、PCR抑制等。
血清抗體檢測(cè)(膠體金,、磁微?;瘜W(xué)發(fā)光、ELISA)用作新型冠狀病毒核酸檢測(cè)陰性病例的補(bǔ)充檢測(cè),,在疑似病例診斷中與核酸檢測(cè)協(xié)同使用,,或用于人群血清學(xué)調(diào)查和既往暴露調(diào)查。實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽(yáng)性病例需滿足以下兩個(gè)條件中的一個(gè):
1.血清新型冠狀病毒IgM和IgG抗體陽(yáng)性,;
2.血清新型冠狀病毒IgG抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性或恢復(fù)期較急性期有4倍及以上升高。
發(fā)病后7天內(nèi)的急性期抗凝血用于IgM和IgG檢測(cè),,如果檢測(cè)結(jié)果陰性,,建議發(fā)病后10天內(nèi)再次采集進(jìn)行檢測(cè)。發(fā)病后3-4周恢復(fù)期血清用于IgG檢測(cè),。如果采用商品化試劑盒,,則以廠家說(shuō)明書為準(zhǔn)。
一,、檢測(cè)前:做核酸檢測(cè)前2小時(shí)盡量避免進(jìn)食,,以免引起嘔吐;采樣前30分鐘做到不喝水和飲料,、不吸煙,、不喝酒、不咀嚼口香糖等,;臨檢要減少吞咽動(dòng)作,,不做清嗓子(咳痰,、吐痰)動(dòng)作。采集鼻咽拭子前,,被檢測(cè)者應(yīng)告知采集人員是否有相關(guān)既往病史或相關(guān)事項(xiàng),。例如鼻腔手術(shù)史、鼻中隔彎曲,、血液病,、咽喉疾病,或服用抗凝藥等相關(guān)危險(xiǎn)因素,;檢測(cè)者需要正確佩戴口罩,,檢測(cè)前取下口罩,檢測(cè)后立即戴好,,可準(zhǔn)備一個(gè)備用口罩,,污染后方便隨時(shí)更換。檢測(cè)等待過(guò)程中保持“一米線”距離,。
二,、檢測(cè)中:在采集口咽拭子時(shí)被檢測(cè)者頭后仰,張口發(fā)出“啊”音,,有助于暴露咽喉,,但過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)刺激性干咳、惡心,、嘔吐等癥狀,,被檢測(cè)者可配合采集人員盡量放松、深呼吸,;采集過(guò)程中可能出現(xiàn)鼻部酸癢感,,刺激打噴嚏,可立即用紙巾(提前備好)或手肘遮擋,。
三,、檢測(cè)后:采集后立即離開采集地點(diǎn),避免在采集地點(diǎn)周圍吐痰,,嘔吐,。核酸檢測(cè)前后都需要注意手部衛(wèi)生,可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭雙手,。另外為了能提高效率,,可提前準(zhǔn)備:由于醫(yī)護(hù)人員防護(hù)嚴(yán)密,可能聽不清講話,,同時(shí)也是為了提高效率,,請(qǐng)務(wù)必一定帶好身份證或戶口本,佩戴口罩(最好帶兩個(gè),,其中一個(gè)備用),,帶包紙巾(采集可能引發(fā)不適流淚),,可以提前把姓名、身份證號(hào),、現(xiàn)在住址,、聯(lián)系電話,提前寫張紙條(寫的時(shí)候注意請(qǐng)保持字體工整,,防止工作人員無(wú)法識(shí)別)交給相關(guān)人員,!
要做好工作預(yù)案和組織管理。要求各地提前做好工作預(yù)案,,明確組織架構(gòu),,理順從“采樣-轉(zhuǎn)運(yùn)-檢測(cè)-結(jié)果回報(bào)”全鏈條的工作流程。同時(shí)為做到高效轉(zhuǎn)運(yùn),,需要統(tǒng)籌檢測(cè)機(jī)構(gòu)布局和檢測(cè)能力等,,利用信息化系統(tǒng)很快把檢測(cè)結(jié)果回報(bào)給公眾?!白龊霉ぷ黝A(yù)案非常重要,,一旦疫情需要開展大規(guī)模核酸檢測(cè),各部門能夠迅速地啟動(dòng)預(yù)案,,協(xié)調(diào)配合做好‘采,、送、檢,、報(bào)’全流程工作來(lái)提高效率,。
原則上以小區(qū)為單位設(shè)置采樣點(diǎn)。采樣點(diǎn)的布局要綜合人口數(shù)量,、地理交通以及核酸檢測(cè)機(jī)構(gòu)的布局,,可以參考每2000-3000人來(lái)設(shè)置一個(gè)采樣點(diǎn),每600-800人設(shè)置一個(gè)采樣臺(tái),。
要加強(qiáng)采樣現(xiàn)場(chǎng)的組織管理,。要設(shè)立清晰的指引標(biāo)識(shí),規(guī)劃好進(jìn)出路線,,保證所有的采樣人員是單向流動(dòng),而且要明確采樣流程和注意事項(xiàng),。為了避免人員聚集,,要求提前通知大家,做好分時(shí)段的預(yù)約,,避免老百姓排隊(duì)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或者是人員過(guò)于集中,,縮短排隊(duì)時(shí)間,減少大家在短時(shí)間內(nèi)聚集,。同時(shí),,要求現(xiàn)場(chǎng)配備好工作人員,、志愿者來(lái)加強(qiáng)采樣秩序的維護(hù),并指導(dǎo)公眾做好個(gè)人防護(hù)以及信息采集,。對(duì)于特殊人群,,比如老年人、孕婦,、孩子,,要求設(shè)立“綠色通道”,讓他們順暢完成采樣,,同時(shí)也增強(qiáng)人性化的關(guān)懷,。
社會(huì)公眾也要給予積極配合。參加核酸檢測(cè)的公眾要戴口罩,,不聚集,,保持安全距離,自覺地服從現(xiàn)場(chǎng)工作人員的指引,,而且采樣過(guò)程中不要觸碰采樣臺(tái)及采樣臺(tái)上任何物品,,采樣結(jié)束后盡快戴上口罩,迅速離開現(xiàn)場(chǎng),。做好大規(guī)模核酸檢測(cè)采樣工作是很不容易的,,需要精細(xì)的組織管理工作,同時(shí)也需要公眾非常好的配合,。
2021年1月份,,各省集中下調(diào)公立醫(yī)院核酸檢測(cè)的政府指導(dǎo)價(jià),單人單檢從每人份120元以上降至80元左右,。
截至9月16日,,已有廣東、湖北,、上海,、天津、河北等共計(jì)30個(gè)省份下調(diào)公立醫(yī)院新冠病毒核酸檢測(cè)價(jià)格,,絕大多數(shù)省份將單人單檢價(jià)格降至每人份60元或更低水平,,10人混檢價(jià)格降至每人份15元或更低水平。
2021年12月10日起,,云南核酸檢測(cè)價(jià)格再次下調(diào),,總費(fèi)用(含檢測(cè)費(fèi)用和單獨(dú)收費(fèi)的核酸檢測(cè)試劑)不超過(guò)40元/次。
2021年12月11日起,,北京市公立醫(yī)療機(jī)構(gòu)新冠病毒核酸檢測(cè)單樣本價(jià)格由58元降低至35元/次,,5樣本、10樣本混合檢測(cè)價(jià)格同步由每樣本18元,、13元統(tǒng)一降低至8元,。
2021年12月3日,,河南省醫(yī)療保障局等六部門聯(lián)合印發(fā)《關(guān)于進(jìn)一步降低新型冠狀病毒核酸檢測(cè)項(xiàng)目?jī)r(jià)格的通知》,明確自2021年12月10日起,,新型冠狀病毒核酸檢測(cè)(標(biāo)本單采)項(xiàng)目?jī)r(jià)格由50元/人次下調(diào)至30元/人次(不含核酸檢測(cè)擴(kuò)增試劑),,新型冠狀病毒核酸檢測(cè)(標(biāo)本混采)項(xiàng)目?jī)r(jià)格由15元/人次下調(diào)至10元/人次。
2021年12月30日,,廣東省發(fā)展改革委,、廣東省財(cái)政廳發(fā)布《關(guān)于進(jìn)一步降低疾控機(jī)構(gòu)新冠病毒核酸檢測(cè)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)的通知》(以下簡(jiǎn)稱“通知”),核酸單樣檢測(cè)最高40元,。
2022年3月,,根據(jù)疫情防控需要,國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜合組研究決定,,推進(jìn)“抗原篩查,、核酸診斷”的監(jiān)測(cè)模式,在核酸檢測(cè)基礎(chǔ)上增加抗原檢測(cè)作為補(bǔ)充,。社區(qū)居民有自我檢測(cè)需求的,,可通過(guò)零售藥店、網(wǎng)絡(luò)銷售平臺(tái)等渠道,,自行購(gòu)買抗原檢測(cè)試劑進(jìn)行自測(cè),。
2022年5月1日,河南再次降低新冠病毒核酸檢測(cè)價(jià)格,,自5月1日起混采每人4元,。
自2022年5月20日起,深圳市新冠病毒核酸單人單檢價(jià)格降至每人份不超過(guò)18元(其中檢測(cè)服務(wù)費(fèi)降至每人份不超過(guò)12.5元),;核酸多人混檢價(jià)格降至每人份不超過(guò)5元,,政府組織的大規(guī)模篩查、常態(tài)化檢測(cè)的多人混檢價(jià)格降至每人份不超過(guò)3元,;抗原檢測(cè)價(jià)格降至每人份不超過(guò)6元(其中檢測(cè)服務(wù)費(fèi)降至每人份不超過(guò)2元),。
2022年5月23日,國(guó)家醫(yī)保局辦公室,、國(guó)務(wù)院應(yīng)對(duì)新型冠狀病毒肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制醫(yī)療救治組印發(fā)《關(guān)于進(jìn)一步降低新冠病毒核酸檢測(cè)和抗原檢測(cè)價(jià)格的通知》,,要求各地在6月10日前將新冠病毒核酸檢測(cè)單人單檢降至不高于每人份16元,多人混檢降至不高于每人份5元,。
自2022年6月10日起,,河南省新冠病毒核酸檢測(cè)標(biāo)本單采項(xiàng)目?jī)r(jià)格由24元/人次下調(diào)至16元/人次(含相關(guān)試劑及耗材),新冠病毒抗原檢測(cè)項(xiàng)目?jī)r(jià)格由15元/人次下調(diào)至6元/人次(含相關(guān)試劑及耗材),。
2021年10月,,國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布《關(guān)于進(jìn)一步強(qiáng)化當(dāng)前新冠病毒核酸檢測(cè)服務(wù)的通知》,。通知要求,,核酸檢測(cè)機(jī)構(gòu)要向社會(huì)提供24小時(shí)核酸檢測(cè)服務(wù),。要加強(qiáng)核酸采樣、送檢,、報(bào)告各環(huán)節(jié)銜接,,在保證檢測(cè)質(zhì)量的前提下,發(fā)揮核酸檢測(cè)儀器設(shè)備最大效能,,在規(guī)定的反饋時(shí)間基礎(chǔ)上,,進(jìn)一步縮短核酸檢測(cè)結(jié)果報(bào)告時(shí)間。特別是對(duì)“愿檢盡檢”人群的核酸檢測(cè),,要力爭(zhēng)在6小時(shí)之內(nèi)報(bào)告結(jié)果,,并通過(guò)信息化手段及時(shí)向群眾推送,鼓勵(lì)根據(jù)檢測(cè)量,,配備新冠病毒核酸快檢試劑及配套設(shè)備,,減少等待時(shí)間。
2022年5月13日,,國(guó)家衛(wèi)健委醫(yī)政醫(yī)管局監(jiān)察專員郭燕紅在國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制新聞發(fā)布會(huì)上表示,,經(jīng)過(guò)兩年多來(lái)積極建設(shè),我國(guó)核酸檢測(cè)能力取得長(zhǎng)足進(jìn)步,。根據(jù)全國(guó)新冠病毒核酸檢測(cè)信息平臺(tái)數(shù)據(jù),,截至目前,全國(guó)有1.3萬(wàn)家醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)可以開展核酸檢測(cè),,全國(guó)擁有15.3萬(wàn)的專業(yè)技術(shù)人員從事核酸檢測(cè)技術(shù)工作,,核酸檢測(cè)能力已經(jīng)能夠達(dá)到單管每日5700萬(wàn)管,總體來(lái)看,,整個(gè)核酸檢測(cè)的能力,,得到了顯著的提升。
2022年5月13日,,國(guó)家衛(wèi)健委醫(yī)政醫(yī)管局監(jiān)察專員郭燕紅在國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制新聞發(fā)布會(huì)上表示,,在大城市建立步行15分鐘核酸“采樣圈”,有利于老百姓就近就便進(jìn)行核酸檢測(cè),,有利于感染的早發(fā)現(xiàn),,進(jìn)一步提高疫情監(jiān)測(cè)預(yù)警的靈敏性。
2022年7月29日,,國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制印發(fā)通知,,要求進(jìn)一步推動(dòng)新冠病毒核酸檢測(cè)結(jié)果全國(guó)互認(rèn)。通知要求:高度重視核酸檢測(cè)結(jié)果全國(guó)互認(rèn)的重要性,;不同渠道展示的核酸檢測(cè)結(jié)果具有同等效力,。
2022年8月,山東健康碼實(shí)現(xiàn)了跨省核酸檢測(cè)結(jié)果展示和互認(rèn)。
2022年12月,,常態(tài)化便民核酸采樣點(diǎn)采取自愿自費(fèi),、單人單管,不再有混采的選項(xiàng),。
2021年8月12日,,新華網(wǎng)消息,德國(guó)政府將從10月起停止向全體民眾提供免費(fèi)新冠病毒檢測(cè),,以期進(jìn)一步推動(dòng)新冠疫苗接種,。
2022年4月19日,國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)發(fā)布《體外診斷檢驗(yàn)系統(tǒng)—核酸擴(kuò)增法檢測(cè)嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒 2(SARS-CoV-2)的要求及建議》(ISO/TS 5798:2022)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),。