電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡的區(qū)別
1、照明源不同
電子顯微鏡所用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流,,而光學(xué)顯微鏡的照明源是可見光(日光或燈光),,由于電子流的波長(zhǎng)遠(yuǎn)短于光波波長(zhǎng),故電子顯微鏡的放大及分辨率顯著地高于光鏡,。
2,、透鏡不同
電子顯微鏡中起放大作用的物鏡是電磁透鏡(能在中央部位產(chǎn)生磁場(chǎng)的環(huán)形電磁線圈),而光學(xué)顯微鏡的物鏡則是玻璃磨制而成的光學(xué)透鏡,。電子顯微鏡中的電磁透鏡共有三組,,分別與光學(xué)顯微鏡中聚光鏡、物鏡和目鏡的功能相當(dāng),。
3,、成像原理不同
在電子顯微鏡中,作用于被檢樣品的電子束經(jīng)電磁透鏡放大后打到熒光屏上成像或作用于感光膠片成像,。其電子濃淡的差別產(chǎn)生的機(jī)理是,,電子束作用于被檢樣品,入射電子與物質(zhì)的原子發(fā)生碰撞產(chǎn)生散射,,由于樣品不同部位對(duì)電子有不同散射度,,故樣品電子像以濃淡呈現(xiàn)。而光學(xué)顯微鏡中樣品的物像以亮度差呈現(xiàn),,它是由被檢樣品的不同結(jié)構(gòu)吸收光線多少的不同所造成的,。
4、分辨率
光學(xué)顯微鏡因?yàn)楣獾母缮媾c衍射作用,,分辨率只能局限于02-05um之間,。電子顯微鏡因?yàn)椴捎秒娮邮鳛楣庠矗浞直媛士蛇_(dá)到1-3nm之間,,因此光學(xué)顯微鏡的組織觀察屬于微米級(jí)分析,,電子顯微鏡的組織觀測(cè)屬于納米級(jí)分析,。
5、景深
一般光學(xué)顯微鏡的景深在2-3um之間,,因此對(duì)樣品的表面光滑程度具有極高的要求,,所以制樣過程相對(duì)比較復(fù)雜。掃描電鏡的精神則可高達(dá)幾個(gè)毫米,,因此對(duì)樣品表面的光滑程度幾何沒有任何要求,,樣品制備比較簡(jiǎn)單,有些樣品幾何無需制樣,。體式顯微鏡雖然也具有比較大的景深,,但其分辨率卻非常的低。
6,、所用標(biāo)本制備方式不同
電子顯微鏡觀察所用組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序較復(fù)雜,,技術(shù)難度和費(fèi)用都較高,在取材,、固定,、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,最后還需將包埋好的組織塊放人超薄切片機(jī)切成50~100nm厚的超薄標(biāo)本片,。而光鏡觀察的標(biāo)本則一般置于載玻片上,,如普通組織切片標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本,、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴片標(biāo)本,。
7、應(yīng)用領(lǐng)域
光學(xué)顯微鏡主要用于光滑表面的微米級(jí)組織觀察與測(cè)量,,因?yàn)椴捎每梢姽庾鳛楣庠匆虼瞬粌H能觀察樣品表層組織而且在表層以下的一定范圍內(nèi)的組織同樣也可被觀察到,,并且光學(xué)顯微鏡對(duì)于色彩的識(shí)別非常敏感和準(zhǔn)確。電子顯微鏡主要用于納米級(jí)的樣品表面形貌觀測(cè),,因?yàn)閽呙桦婄R是依靠物理信號(hào)的強(qiáng)度來區(qū)分組織信息的,,因此掃描電鏡的圖像都是黑白的,對(duì)于彩色圖像的識(shí)別掃描電鏡顯得無能為力,。掃描電鏡不僅可以觀察樣品表面的組織形貌,,通過使用EDS、WDS,、EBSD等不同的附件設(shè)備,,掃描電鏡還可進(jìn)一步擴(kuò)展使用功能。通過使用EDS,、WDS輔助設(shè)備,,掃描電鏡可以對(duì)微區(qū)化學(xué)成分進(jìn)行分析,這一點(diǎn)在失效分析研究領(lǐng)域由為重要,。使用EBSD,,掃描電鏡可以對(duì)材料的晶格取向進(jìn)行研究,。
8、放大倍數(shù)
光學(xué)顯微鏡有效放大倍數(shù)1000X,。電子顯微鏡有效放大倍數(shù)可達(dá)到1000,000X ,。