一,、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號繁多,但其基本結(jié)構(gòu)由以下幾部分組成:光源,、單色器,、吸收池、檢測系統(tǒng)及信號顯示系統(tǒng),。
1、光源
在吸光度的測量中,,要求光源發(fā)出的所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜具有足夠的光強(qiáng)度,,并能在一定時間內(nèi)保持穩(wěn)定。
2,、單色器
單色器是能將光源發(fā)射的連續(xù)光源分解為單色光并從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng),。它由入射狹縫、準(zhǔn)光器,、色散原件,、聚焦元件和出射狹縫等幾個部分組成。
3,、吸收池
吸收池又稱比色皿,,用于盛裝參比溶液和待測試液。儀器一般配有液層厚度為0.5cm,、1cm,、2cm、3cm等的長方形比色皿,。
4,、檢測系統(tǒng)
檢測系統(tǒng)通常通過利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y的電信號,而且所產(chǎn)生的電信號應(yīng)與照射于檢測器上的光信號成正比,??梢姺止夤舛扔嫵3J褂霉怆姽芑蚬怆姳对龉茏鰴z測器。
5,、信號顯示系統(tǒng)
光電轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生的各種電信號,,經(jīng)放大等處理后,用一定方式顯示出來,,以便于計算和記錄,。
二,、分光光度計原理
分光光度計的原理是采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,,從而產(chǎn)生特定波長的光源,,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,,計算樣品的吸光值,,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,樣品的吸光值與樣品的濃度成正比,。
三,、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量待測物質(zhì)對可見光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,,稱為可見分光光度計,。
2、紫外可見分光光度計
紫外可見光譜儀用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200-760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,,可以測定核酸和蛋白的濃度,,也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
3,、紅外分光光度計
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,,這是研究有機(jī)化合物最常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣,、液,、固)的試樣。
4,、熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,,應(yīng)用于科研、化工,、醫(yī)藥,、生化、環(huán)保以及臨床檢驗,、食品檢驗,、教學(xué)實驗等領(lǐng)域,通過對這些參數(shù)的測定,,不但可以做一般的定量分析,,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系,。