一,、色譜柱的日常維護(hù)方法
流動相處理:流動相需使用高純度的試劑和超純水配制,,使用前要經(jīng)過 0.45μm 或更小孔徑的濾膜過濾,去除顆粒雜質(zhì),,同時進(jìn)行脫氣處理,,防止氣泡進(jìn)入色譜柱影響分離效果和損壞色譜柱。
樣品處理:樣品應(yīng)盡可能溶解在與流動相組成相近的溶劑中,,進(jìn)樣前需經(jīng)過過濾或離心處理,,去除不溶性雜質(zhì),避免堵塞色譜柱,。對于復(fù)雜樣品,,可進(jìn)行預(yù)處理,如萃取,、凈化等,,以減少雜質(zhì)對色譜柱的污染。
流速控制:在使用新色譜柱時,,應(yīng)從較低的流速開始逐漸增加,,直至達(dá)到最佳分離效果的流速,避免初始流速過高對色譜柱造成沖擊,。同時,,要確保流速穩(wěn)定,避免流速的突然變化對色譜柱填料產(chǎn)生破壞,。
柱溫控制:根據(jù)色譜柱的使用要求和樣品的性質(zhì),,選擇合適的柱溫。一般來說,,柱溫應(yīng)保持在色譜柱的耐受溫度范圍內(nèi),,避免過高或過低的溫度對色譜柱造成損傷。同時,,要避免柱溫的急劇變化,,防止色譜柱填料因熱脹冷縮而損壞。
二,、色譜柱的定期維護(hù)方法
沖洗色譜柱:在分析結(jié)束后,,應(yīng)及時用適當(dāng)?shù)娜軇_洗色譜柱,以去除殘留的樣品,、流動相和雜質(zhì),。對于反相色譜柱,通常先用高比例的水相沖洗,,再用有機(jī)溶劑沖洗,;對于正相色譜柱,則先用有機(jī)溶劑沖洗,,再用低極性溶劑沖洗,。沖洗時間一般為 30-60 分鐘,,具體時間可根據(jù)色譜柱的污染程度和使用情況進(jìn)行調(diào)整。
檢查柱效:定期通過分析標(biāo)準(zhǔn)樣品或已知混合物來檢查色譜柱的柱效,。如果發(fā)現(xiàn)柱效下降,,可能是由于色譜柱污染,、填料流失或其他原因引起的,,需要及時采取相應(yīng)的措施進(jìn)行處理,如重新平衡色譜柱,、進(jìn)行柱再生或更換色譜柱,。
三、色譜柱的保存方法
干燥保存:如果色譜柱需要長時間保存,,應(yīng)將其沖洗干凈后,,用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑(如甲醇、乙腈等)充滿色譜柱,,然后密封兩端,,放置在干燥、陰涼,、避光的地方保存,。避免將色譜柱暴露在空氣中,防止填料干燥收縮或吸收空氣中的水分和雜質(zhì),。
定期活化:對于長期未使用的色譜柱,,在重新使用前,應(yīng)進(jìn)行活化處理,。一般是用流動相以較低的流速沖洗色譜柱,,使其達(dá)到平衡狀態(tài)?;罨瘯r間可能需要數(shù)小時甚至更長,,具體時間取決于色譜柱的類型和保存時間。