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高效液相色譜儀有什么特點(diǎn) 高效液相色譜儀原理是什么

摘要:1960年代,由于氣相色譜對(duì)高沸點(diǎn)有機(jī)物分析的局限性,,為了分離蛋白質(zhì),、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜,。1960年代末科克蘭(Kirkland),、哈伯、荷瓦斯(Horvath),、莆黑斯,、里普斯克等人開發(fā)了世界上第一臺(tái)高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時(shí)代,。接下來(lái)本文將簡(jiǎn)單介紹高效液相色譜儀有什么特點(diǎn)以及高效液相色譜儀原理是什么,,一起到文中來(lái)看看吧!

一,、高效液相色譜儀有什么特點(diǎn)

高效液相色譜儀的顯著特征是高壓,、高速、高效,、高靈敏度,、高選擇性和應(yīng)用范圍廣等。

1,、高壓

高效液相色譜儀為了獲得高柱效,,使用的固定相粒徑很小(<10um),,液體流動(dòng)相高速通過時(shí),,產(chǎn)生很高的壓力,工作壓力范圍為1.5×107~3.5×107Pa,。

2,、高速

由于釆用了高壓,流動(dòng)相流速快,,所需的分析時(shí)間比經(jīng)典液相柱色譜儀少得多,。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能約3萬(wàn)塔板/米,,氣相色譜儀的柱效能約2000塔板/米,。

4、高靈敏度

由于采用了高靈敏度的檢測(cè)器,,最小檢測(cè)量可達(dá)10-9g,,甚至10-11g,而所需樣品量很少,。

5,、高選擇性

可以通過控制流動(dòng)相改善分離過程的選擇性,。

6、應(yīng)用范圍廣

高效液相色譜儀可用于高沸點(diǎn),、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質(zhì)的分析,。一般來(lái)說(shuō),沸點(diǎn)在450℃以下,,相對(duì)分子質(zhì)量小于450的有機(jī)物可用氣相色譜儀分析,,但這些物質(zhì)只占有機(jī)物的15%~20%,其余的80%~85%有機(jī)物原則上可采用高效液相色譜儀分析,。

二,、高效液相色譜儀原理是什么

高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備,。它由儲(chǔ)液器、泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱、檢測(cè)器,、記錄儀等幾部分組成,。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,,通過檢測(cè)器時(shí),,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái),。

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