一,、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液相色譜儀(HPLC)和液相色譜儀(LC)都是使用液體移動(dòng)相將樣品分離開來(lái)的儀器,。HPLC是在LC的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的,在分離性能,、分析效率,、檢測(cè)靈敏度等方面均有所提高,。HPLC主要應(yīng)用于有機(jī)化學(xué),、生化、藥學(xué),、環(huán)境分析等領(lǐng)域,。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區(qū)別
雖然高效液相色譜儀和液相色譜儀都屬于液相色譜儀類別,,但它們?cè)诜蛛x性能,、分析效率、檢測(cè)靈敏度等方面均有所不同:
1,、分離性能的區(qū)別
HPLC的分離性能比LC更好,,分離效率更高,分離劑更多樣化,。HPLC在柱子填充材料和柱子直徑等方面具有更多變化的選擇,,可根據(jù)不同的樣品和要求設(shè)計(jì)出不同的柱子,從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果,。
2,、分析效率的區(qū)別
HPLC擁有更快的分析速度和更快的洗脫速度,可以更快地得到分離和檢測(cè)結(jié)果。此外,,HPLC中使用的柱子通常較長(zhǎng),,能夠保證更高的峰分辨率和更好的分析效率。
3,、檢測(cè)靈敏度的區(qū)別
HPLC的流動(dòng)相流速更快,,反相柱分離更好,它能夠在較短的時(shí)間內(nèi),,更準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)微的化學(xué)物質(zhì),,與LC相比,更適用于高靈敏度分析和有機(jī)化合物的分析,。
三,、高效液相色譜儀的分類有哪些
高效液相色譜儀主要有三類:正相高效液相色譜儀、反相高效液相色譜儀和超高效液相色譜儀(超高效液相色譜儀),。
1,、盡管有名稱,正相高效液相色譜儀并不是最常用的高效液相色譜儀方法,。正相高效液相色譜儀使用非極性溶劑作為流動(dòng)相,,硅膠顆粒作為固定相。在常規(guī)高效液相色譜儀中,,與非極性化合物相比,,極性化合物在固定相中會(huì)更長(zhǎng)時(shí)間地粘附在極性有機(jī)硅上。因此,,非極性化合物在正常高效液相色譜儀中的洗脫速度更快,。孔徑一般在3微米左右,。
2,、反相高效液相色譜儀是最常見(jiàn)的高效液相色譜儀類型。在反相高效液相色譜儀中,,固定相被烴鏈(通常長(zhǎng)8-18個(gè)碳)改性,,導(dǎo)致色譜柱變?yōu)榉菢O性。也使用極性溶劑,。在反相高效液相色譜儀中,,樣品中的極性分子會(huì)與溶劑產(chǎn)生強(qiáng)烈的吸引力,從而使它們更快地洗脫,。它們也不會(huì)與非極性固定相相互作用,。非極性化合物會(huì)與固定相產(chǎn)生范德華力和分散相互作用,因此它們的洗脫速度較慢,。
3,、與高效液相色譜儀相比,,超高效液相色譜儀運(yùn)行速度更快、使用的溶劑更少且分辨率更高,。色譜柱也更小,,固定相顆粒的尺寸要小得多。較小的孔(亞2微米)促進(jìn)了分子更好的分離和分辨率,。較短的色譜柱還可以進(jìn)行快速檢測(cè),。然而,超高效液相色譜儀不能用于干燥或未過(guò)濾的樣品,,因?yàn)檩^小的孔會(huì)堵塞,,這是一個(gè)昂貴且耗時(shí)的修復(fù)過(guò)程。