一,、培養(yǎng)基的種類有哪些
培養(yǎng)基是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),,它的種類眾多,,按照不同的分類方法可分為不同類型,一般主要有化學(xué)分類,、物理分類和用途分類三種分類方法:
1,、化學(xué)分類
(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基,。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等,。常用的天然有機營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁,、玉米粉、土壤浸液,、麩皮,、牛奶、血清,、椰子汁等,。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實驗室經(jīng)常使用外,也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn),。
(2)組合培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基,。例如,,高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,,配制合成培養(yǎng)基時重復(fù)性強,,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,,一般適于在實驗室用來進行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求,、代謝、分類鑒定,、生物量測定,、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。
(3)半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基,。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。
2,、物理分類
(1)液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,。
(2)固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基,、天然固態(tài)培養(yǎng)基,、濾膜。
(3)半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基,。
(4)脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。
3,、用途分類
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:大多數(shù)微生物共同需要的營養(yǎng)基礎(chǔ),。某--微生物如有特殊需要,可在此基礎(chǔ)上添加某種成分即可,,如蛋白胨水,、肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂等,。1%蛋白胨水培養(yǎng)基便是一個最簡單的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,該基礎(chǔ)培養(yǎng)基本身可供一般細(xì)菌增菌培養(yǎng)和靛基質(zhì)試驗用,若再加入指示劑和糖類,則配成糖發(fā)酵培養(yǎng)基,,供糖發(fā)酵試驗用,,成為鑒別培養(yǎng)基;若在1%蛋白胨水中增加氯化鈉用量并將pH提高到8.6左右,,則變成堿性蛋白胨水,,用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng),成為專用增菌培養(yǎng)基,。
(2)營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些特殊的營養(yǎng)物質(zhì),,如葡萄糖、血液,、血清,、酵母浸膏、生長因子等,,可供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌在其中生長,。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長,;結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋,、馬鈴薯、甘油等,。最常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板,。
(3)增菌培養(yǎng)基:一般為液體培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng),,可泛用,,也可專用,,在專用增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或生長因子,。
(4)選擇性培養(yǎng)基:一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,,廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。
(5)鑒別培養(yǎng)基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,,從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基,。例如,伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基(EMB),。
(6)厭氧菌培養(yǎng)基:供厭氧菌的分離,、培養(yǎng)和鑒別用的培養(yǎng)基,稱為厭氧菌培養(yǎng)基,。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,,如細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶、超氧化歧化酶,,所以造成自身代謝的缺陷,,無法進行有氧代謝,而無氧酵解所產(chǎn)生的能量又不足,,因此厭氧菌在正常的大氣環(huán)境下不能生長和生存,。為使厭氧菌能正常生長,必須制備營養(yǎng)成分豐富,,氧化還原電勢較低,,具有特殊生長因子的專用培養(yǎng)基。
(7)細(xì)胞培養(yǎng)基:是指用于各種目的的體外培養(yǎng),、保存,、運輸活組織、器官及細(xì)胞的液體,,實質(zhì)為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,,使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。由于其成分?jǐn)?shù)量明確并可通過調(diào)節(jié)某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學(xué)改變,,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)科的研究,。
二、如何選擇合適種類的培養(yǎng)基
對于微生物的培養(yǎng),,選擇合適的培養(yǎng)基是很重要的,,現(xiàn)在對培養(yǎng)基的選擇還沒有一個統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),不過有幾點建議可供參考:
1,、建立某種微生物所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種微生物首選的培養(yǎng)基,。可以查閱參考文獻(xiàn),,或在購買微生物時咨詢,。
2、其他實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,,許多培養(yǎng)基可以適合多種微生物,。
3、根據(jù)微生物的特點,、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基,。如小鼠細(xì)胞株多選RPMI1640培養(yǎng)基。
4,、用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的微生物,,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線,、集落形成率等指標(biāo)判斷,,根據(jù)實驗結(jié)果選擇最佳培養(yǎng)基,,這是最客觀的方法,但比較繁瑣,。