一,、培養(yǎng)基配好后為什么必須立即滅菌

培養(yǎng)基配好后，必須要馬上進(jìn)行滅菌處理,，這是為什么呢,？

之所以培養(yǎng)基配好就要滅菌，是因?yàn)槲礈缇膭倓偱渲煤玫呐囵B(yǎng)基是暴露在環(huán)境中的,，可能染上環(huán)境中的大量細(xì)菌,，而培養(yǎng)基也是這些細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的良好條件；如果不及時(shí)滅菌,，會(huì)導(dǎo)致在環(huán)境中染上的細(xì)菌大量繁殖,，消耗培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分，甚至產(chǎn)生有害物質(zhì),，造成培養(yǎng)基滅菌后也不能使用,。

二、如何檢查滅菌后的培養(yǎng)基是否為無(wú)菌

滅菌后,，如果要求比較嚴(yán)格,，必須是無(wú)菌培養(yǎng)基的話，可以進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn),，具體的方法是：

將已經(jīng)滅完菌的菌棒放到25－28℃的恒溫環(huán)境中避光培養(yǎng)3天后,，拿出來(lái)檢查看袋內(nèi)有沒(méi)有雜菌滋生的痕跡，看菌袋內(nèi)有沒(méi)沒(méi)有導(dǎo)演變色,、出現(xiàn)斑點(diǎn)等情況的發(fā)生,，如果有就證明滅菌不徹底。

三,、影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素有哪些

培養(yǎng)基滅菌要求要徹底,，不徹底的話可能影響微生物的培養(yǎng)，一般影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素主要有：

1,、營(yíng)養(yǎng)成分的保持

濕熱滅菌時(shí),，微生物被殺死的同時(shí)，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素,。如在121℃,，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞,。在熱的作用下某些營(yíng)養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營(yíng)養(yǎng)成分的數(shù)量變化,，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量,。

2、微生物的耐熱性

細(xì)菌芽孢的熱阻較大,，滅菌所需要的時(shí)間取決于把細(xì)菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時(shí)間,。

3、pH值

pH值對(duì)微生物的耐熱性影響很大,。pH值介于6.0~8.0時(shí),，微生物最不易死亡。pH<6.0時(shí),，微生物比較容易死亡,，此時(shí)H 很容易滲入微生物的細(xì)胞，從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng),，促使其死亡,。所以培養(yǎng)基的pH越低，所需的時(shí)間也越短,。

4,、培養(yǎng)基成分

油脂、糖類及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機(jī)物會(huì)包于細(xì)胞的周圍形式一層薄膜,、影響熱的傳導(dǎo),。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性,，滅菌較易,。例如：大腸桿菌在水中加熱至60-65℃便死亡，在10%糖液中需70℃加熱4-6分鐘才死亡,，在30%糖液中需30分鐘才死亡,。一般糖類含量較多的時(shí)候最好選用115℃，30分鐘,；一般的培養(yǎng)基可選擇121℃20分鐘,。

5、泡沫

泡沫中的空氣形成隔熱層,，使熱量難以滲透進(jìn)去,，殺死其中的雜菌,。

6、顆粒

顆粒小,，容易滅菌,，顆粒大，則難滅菌,。對(duì)于含有少量較大顆粒及粗纖維的培養(yǎng)基,，可用粗濾的方法（不應(yīng)影響培養(yǎng)基質(zhì)量）予以除去，培養(yǎng)基結(jié)塊會(huì)造成培養(yǎng)基滅菌的不徹底,。

8,、滅菌鍋內(nèi)空氣是否排凈

這個(gè)是影響滅菌是溫度和壓力比例關(guān)系的要點(diǎn)，同樣達(dá)到了相同的壓力的情況下,，如果空氣未能排凈,，也就是說(shuō)不是純蒸汽滅菌，此時(shí)的溫度不一定能達(dá)到目的要求,，會(huì)嚴(yán)重影響滅菌效果。