一,、什么是細胞培養(yǎng)基

細胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基，既是供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),，也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境,，一般是鹽、碳水化合物,、維生素,、氨基酸、代謝前體,、生長因子,、激素和微量元素的復(fù)雜混合物。

二,、常用的細胞培養(yǎng)基有哪些

細胞培養(yǎng)基的種類眾多,，由于不同細胞系對這些成分的要求各不相同，因此產(chǎn)生了不同類型的培養(yǎng)基,，常用的細胞培養(yǎng)基主要有：

1,、MEM培養(yǎng)基

是一種添加了營養(yǎng)物的最低必需培養(yǎng)基，僅含有12種必需氨基酸,、L-谷氨酰胺和8種維生素,，含糖量為1g/L。MEM是一種最基礎(chǔ),、最常用的細胞培養(yǎng)基,，主要應(yīng)用于貼壁細胞的培養(yǎng)，在添加血清后,，可用于培養(yǎng)多種單層生長的細胞,，如成纖維細胞,。修改配方后的a-MEM則可廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞培養(yǎng)。

2,、DMEM培養(yǎng)基

氨基酸含量是MEM的兩倍,，維生素含量是MEM的4倍，以及硝酸鐵,、丙酮酸鈉和一些補充氨基酸,。此外，DMEM分為低糖型和高糖型,，葡萄糖含量分別為1g/L和4.5g/L,。（低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快,、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng),；高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差,，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。）

3,、IMDM培養(yǎng)基

用于淋巴細胞和雜交瘤細胞的生長,。與DMEM相比，添加了HEPES和硒,，硝酸鉀取代了硝酸鐵,，并且含有更多的氨基酸、維生素和無機鹽,。

4,、Ham 's F-12K培養(yǎng)基

用于支持原代細胞的生長和分化。F-12K增加了氨基酸,、丙酮酸,、生物素、鈣,、鎂,、腐胺和酚紅的含量。

5,、DMEM/F12培養(yǎng)基

DMEM和F12的1:1混合物,，能夠在低血清條件下支持多種哺乳動物細胞的培養(yǎng)，在此培養(yǎng)基中成功培養(yǎng)的細胞包括：MDCK,、神經(jīng)膠質(zhì)細胞,、成纖維細胞和人內(nèi)皮細胞等。

6,、McCoy’s 5A培養(yǎng)基

廣泛用于多種原代細胞及細胞系的培養(yǎng),，如來源于骨髓,、皮膚、脾臟,、腎臟和肺等組織的哺乳動物原代細胞,。

7、RPMI-1640培養(yǎng)基

是在McCoy’5A的基礎(chǔ)上進行改良研發(fā)出的,，最初用于人白血病細胞的懸浮培養(yǎng),，后來發(fā)現(xiàn)也適用于HeLa、MCF-7,、PC12,、外周血單核細胞（B/T淋巴細胞）和星形細胞的培養(yǎng)。RPMI 1640與其它培養(yǎng)基的區(qū)別是含有還原型谷胱甘肽和高濃度維生素。此外還含有含有MEM,、DMEM中不含的生物素,、維生素B12和對氨基苯。

8,、L15培養(yǎng)基

L-15培養(yǎng)基的配方中不含用于CO2平衡環(huán)境的碳酸鹽緩沖系統(tǒng), 而是用磷酸鹽,、L-精氨酸、L-組氨酸和 L-半胱氨酸作為緩沖劑,。用半乳糖和丙酮酸鈉代替葡萄糖以防止乳酸的形成,。可以在無CO2培養(yǎng)箱中進行細胞培養(yǎng),，或者擰緊瓶蓋培養(yǎng),。

三、細胞培養(yǎng)基的品質(zhì)要求

細胞培養(yǎng)基有多種,，不同種類的細胞培養(yǎng)基用于培養(yǎng)不同細胞,，一般來說，好的細胞培養(yǎng)基,，需要滿足以下幾點要求：

1,、外觀

顏色、粉末細度須均勻,。

2,、溶解性

培養(yǎng)基完全溶解，可以避免培養(yǎng)基內(nèi)營養(yǎng)成分的流失,。

3,、pH值

哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度，同時pH值的測定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異,。

4,、水分

培養(yǎng)基的營養(yǎng)成份很豐富,，利于微生物的滋長，因此水分的含量控制可以延長有效期,。

5,、冰點滲透壓

細胞必須生活在合適的滲透壓環(huán)境中，同時滲透壓值的測定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異,。

6,、菌落總數(shù)

粉末培養(yǎng)基不是無菌制劑，培養(yǎng)基本身的營養(yǎng)成分很豐富,，容易滋生微生物,，因此菌落的控制可以延長有效期

7、細胞生長試驗

可檢查細胞培養(yǎng)基是否有促生長的能力,，以及是否有不利細胞生長的毒素,。

8、細菌內(nèi)毒素

為滿足生物制品細菌內(nèi)毒素的控制要求,，作為生物制品生產(chǎn)原料的培養(yǎng)基同樣需要細菌內(nèi)毒素控制,。

9、穩(wěn)定性

確定產(chǎn)品的儲存,、運輸條件,，產(chǎn)品的保質(zhì)期限。

10,、一致性

驗證產(chǎn)品的均一性,。