一、培養(yǎng)基滅菌的方法有哪些

培養(yǎng)基配制好后,，必須立即滅菌,，因?yàn)槿绻L(zhǎng)時(shí)間不進(jìn)行滅菌，培養(yǎng)料內(nèi)的微生物就會(huì)在料內(nèi)發(fā)酵生長(zhǎng),，從而破壞培養(yǎng)基內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成分,。一般來(lái)說(shuō)，培養(yǎng)基的滅菌方法主要有以下六種：

1,、干熱滅菌

多用于耐熱器皿滅菌,，例如移液管和玻璃平皿等,、玻璃試管或者金屬器皿等等，可在170攝氏度滅菌2-4h,，也可在200所說(shuō)的滅菌0.5-1h,。接種環(huán)，接種針等,、涂布棒之類的實(shí)驗(yàn)器材,，可用酒精燈直接灼燒滅菌。

滅菌效果：滅菌效果好,，能殺死一切微生物,，芽孢也不例外。

注意事項(xiàng)：干熱滅菌過(guò)程的熱穿透效果差且比較慢,，因此在烘箱內(nèi)進(jìn)行干熱滅菌時(shí),，不可擺放過(guò)滿；塑料,、橡膠等不耐熱材質(zhì)不可采用此方法滅菌,；紙、棉的滅菌溫度不能超過(guò)170℃,。

2,、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通常用于實(shí)驗(yàn)室大部分培養(yǎng)基的滅菌，亦可用在玻璃器皿上,、金屬器皿滅菌,。通常采用121°C高壓滅菌15-20min或116°C高壓滅菌30min，滅菌參數(shù)可以依據(jù)培養(yǎng)基的不同而調(diào)節(jié),。

滅菌效果：它能殺死一切微生物,，芽孢也不例外。

注意事項(xiàng)：滅菌時(shí)冷空氣沒(méi)有排出,、培養(yǎng)基本身含有過(guò)多的芽孢,、滅菌方式不當(dāng)、滅菌鍋中的物品放置過(guò)滿,，均會(huì)造成滅菌的失?。辉谶M(jìn)行容器滅菌時(shí),，容器不可密封,，需與滅菌鍋內(nèi)空氣流通。

3,、水浴-加熱-流動(dòng)蒸汽滅菌

常用于含有不耐熱成分培養(yǎng)基的滅菌,，如XLD瓊脂等、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等,、亞硫酸鉍瓊脂等等,。用流動(dòng)蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,，若無(wú)對(duì)應(yīng)流動(dòng)蒸汽滅菌設(shè)備，既可用水浴加熱,，也可用“蒸”法殺菌,。

滅菌效果：能殺死微生物的繁殖體，無(wú)法殺死芽孢體,，用這種方法殺菌的培養(yǎng)基,，一般抑菌性較強(qiáng)，或者需要很短的時(shí)間,。

注意事項(xiàng)：不同培養(yǎng)基成分耐熱性有差別,，加熱時(shí)應(yīng)注意，如將含有亞硒酸鹽的培養(yǎng)基（SC,、SBG等）加熱到90°C左右,，過(guò)高的加熱可導(dǎo)致亞硒酸氫鈉的分解，培養(yǎng)基變紅色,，含有瓊脂的培養(yǎng)基可以加熱沸騰4-6次,，也可以沸水浴后20-30min讓瓊脂充分溶解。

4,、過(guò)濾滅菌

多用于抗生素或含有不耐熱成分的培養(yǎng)基滅菌,，通常采用孔徑為0.22μm微孔濾膜或者濾芯過(guò)濾除菌。實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)無(wú)菌空氣時(shí)亦可使用此法,，采用特殊濾芯或者濾網(wǎng),，過(guò)濾和除菌空氣。

滅菌效果：能去除常見(jiàn)的細(xì)菌,，真菌和芽孢體,，卻無(wú)法去除支原體，病毒和其他體積微小的生物,。

注意事項(xiàng)：使用前通常需按照說(shuō)明書(shū)使濾膜或?yàn)V芯浸濕,；需要嚴(yán)格遵守過(guò)濾器或者濾膜的指示,，速度過(guò)快或者過(guò)濾體積過(guò)大都會(huì)造成濾膜的斷裂和除菌的失?。火ざ容^大或有沉淀的培養(yǎng)基不適合用此方式除菌,。

5,、輻照滅菌

微波、紫外線,、X射線,、γ射線都可以進(jìn)行滅菌。γ射線具有很強(qiáng)的穿透力,，滅菌效果良好,，在食品中得到了廣泛的應(yīng)用,、藥品行業(yè)的產(chǎn)品滅菌，亦多用于微生物培養(yǎng)基中,、實(shí)驗(yàn)器材的滅菌,。某些特殊培養(yǎng)基或者添加劑成分，由于不宜采用高溫蒸汽滅菌,、過(guò)濾除菌等等,，可用γ射線照射滅菌。紫外線殺菌作用弱,，很少有穿透力,，一般只適用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣或者物體表面的殺菌。

滅菌效果：γ射線具有良好的滅菌和穿透力,，能殺滅一切微生物,，芽孢體也不例外。

注意事項(xiàng)：并非所有培養(yǎng)基都可以采用γ射線輻照滅菌方式,，一些染料或不穩(wěn)定成分經(jīng)輻照后會(huì)發(fā)生變化,；γ射線對(duì)瓊脂有一定的損傷，所以在固體培養(yǎng)基滅菌的過(guò)程中,，輻照劑量及瓊脂的加入量均需適當(dāng)調(diào)整,；玻璃制品、金屬制品一般不可采用此方法滅菌,。

6,、化學(xué)試劑滅菌

通常用環(huán)氧乙烷殺菌，及各種消毒劑的浸泡滅菌,。環(huán)氧乙烷在平皿中曾經(jīng)得到廣泛應(yīng)用,、對(duì)一次性醫(yī)療產(chǎn)品進(jìn)行滅菌，卻因環(huán)境污染大,，滅過(guò)菌后的制品需要較長(zhǎng)時(shí)間放置,，讓環(huán)氧乙烷散去，目前已逐漸為其他滅菌方式所代替,。

滅菌效果：不同消毒劑的殺滅效果是有區(qū)別的,，粗略地可以分為低效消毒劑、中,，高效消毒劑,。環(huán)氧乙烷是一種高效消毒劑，能殺死含有芽孢等一切微生物,。

注意事項(xiàng)：此類滅菌方式通常會(huì)有殘留,，且對(duì)環(huán)境有污染，因此一般不適合用于直接進(jìn)行微生物培養(yǎng)相關(guān)器皿滅菌,；殺菌能力越強(qiáng)的消毒劑,，刺激性,、腐蝕性、毒性往往越大,，使用時(shí)需注意防護(hù),。

二、培養(yǎng)基滅菌用哪種方法好

培養(yǎng)基的滅菌方法眾多,，采用不適當(dāng)?shù)臏缇椒赡軙?huì)破壞培養(yǎng)基的質(zhì)量,，會(huì)改變顏色、透明度降低,、pH變化等,，那么哪種方法比較好呢？

由于不同微生物培養(yǎng)需要的培養(yǎng)基不同,，滅菌方法的選擇方面也有所不同,，一般來(lái)說(shuō)，培養(yǎng)基的滅菌方法應(yīng)按照說(shuō)明書(shū)或驗(yàn)證試驗(yàn)參數(shù)來(lái)采用不同方法,，常規(guī)的是采用濕熱滅菌,，特殊要求的采用薄膜過(guò)濾等。