一,、熒光酶標儀和普通酶標儀的區(qū)別在哪里
熒光酶標儀和普通酶標儀兩者最大的區(qū)別就是原理的不同。
1,、 熒光酶標儀
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,,被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀,,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,,當測繪熒光發(fā)射光譜時,,將激發(fā)光單色器的光柵,固定在最適當?shù)募ぐl(fā)光波長處,,而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上,,所記錄的光譜即發(fā)射光譜,。
當測繪熒光激發(fā)光譜時,將熒光單色器的光柵固定在最適當?shù)臒晒獠ㄩL處,,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動,將各波長的激發(fā)光的強度訊號輸出至記錄儀,,所記錄的光譜即激發(fā)。
當進行樣品溶液的定量分析時,,將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處,將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長處,,由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。
2,、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光,。光吸收酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物吸光值,。
光通過被檢測物,,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系,。
檢測單位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,,表示被檢測物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),,其中trans為檢測物的透光值,。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,,Ι0為在檢測物之前的光強度,,Ι為從被檢測物出來的光強度,。
二,、熒光酶標儀和 普通酶標儀哪個更好
前文已經(jīng)簡單了解到了熒光酶標儀和普通酶標儀的區(qū)別在哪里,,那么在選擇的時候,,熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好呢?
1,、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優(yōu)點:檢測檢測技術成熟,,成本低,操作簡單,。
缺點:動態(tài)范圍窄,,靈敏度比較低,,特異性不強。
2,、熒光酶標儀
優(yōu)點:靈敏度高,可實時檢測,,使用方便,檢測模式多樣,。
缺點:易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,。
因此,兩者比較起來,,各有自己的優(yōu)缺點,,根據(jù)自己的實際情況進行選擇即可,。